公司:www.kapabiosystems.com
Kapa是世界上著名的生物技術公司。總部位于美國波士頓, 公司的主要理念是運用分子和遺傳學技術來打造新一代的生物科學和醫學診斷產品。
Kapa公司目前主要是在“直接進化(directed evolution technology platform)”的技術平臺上來篩選和生產高品質的生物酶。目前生物醫藥領域所使用的大部分生物酶都只是天然存在形式,即使有些酶經過基因工程改造,但是由于酶分子自身的結構和功能限制,要想得到真正滿足科研工作人員需要的產品,卻是一件費時費力的事情,而且常常達不到預期的要求。“直接進化”技術正是針對這一現實情況,運用遺傳,基因工程,生物信息學等技術來在分子水平上設計真正滿足不同實際要求的生物酶。通過創新,Kapa為廣大的科研人員提供了一系列擁有多項技術的產品,不僅能夠滿足普通科研需要,同時為高通量,基因芯片等的普及創造了條件。 運用“直接進化”技術,Kapa目前已經開發出來了以下的高品質產品: 1. Kapa2G*PCR (Kapa2G Robust PCR)。適用范圍:可用于普通的PCR反應中;AT和GC堿基含量高的擴增;模板 中含有常見的PCR反應抑制物,例如,鹽離子,尿素,SDS,乙醇,EDTA等;石蠟油包被樣品;糞便樣品;菌落PCR。 2. Kapa2G 快速PCR(Kapa2G Fast PCR)。高靈敏度,高特異性。延伸速度高達1秒/kb,(常規延伸速度是60s/kb),可擴增出長達5kb的目的片段,節省大約75%的反應時間。 3.實時熒光定量PCR (Kapa SYBR qPCR)。和其他公司的類似產品相比,Kapa SYBR qPCR改造了Taq DNA多聚酶,而不是對熒光染料進行化學改造,因此大大提高了信號強度以及反應的有效性。更重要的是,Kapa的系列產品可以適用于市場上現有的Real-time PCR儀器。 4.Kapa長片段DNA多聚酶 (Kapa LongRange)。Kapa長片段DNA多聚酶是由Taq DNA聚合酶和修飾過的archael(B型)高保真DNA聚合酶組成的雙酶系統。后者含有校正功能。這種雙酶系統是專門為長片段和敏感PCR擴增而設計的。一般而言,普通的Taq酶由于缺少校正功能,因此隨著錯誤堿基的不斷產生,使得擴增過早的終止,從而大大降低了擴增效率。這也是導致在擴增長片段或者模板濃度很低時,使用普通Taq酶常常失敗的原因。另一方面,雖然具有校正能力的多聚酶擁有很高的正確率,但由于其3到5的外切酶活性,引物會被降解掉,從而也影響到擴增的靈敏度。Kapa長片段產品的原理是:在Taq DNA多聚酶中加入具有校正能力并且修飾過的多聚酶,可以使得不匹配的堿基被修正;同時,和只有校正功能的多聚酶相比,kapa的雙酶系統中具有校正功能的酶所占的比例較少,因此可以相對延長擴增的循環數和時間,從而提高產量,同時得到高保真的PCR產物。雖然兩種酶都有5到3的DNA聚合功能,但是只有Taq酶具有依賴于雙鏈的5到3的聚合酶活性,而只有B型DNA聚合酶具有3到5的外切酶功能(也就是校正功能)。
5.Kapa高保真DNA多聚酶 (Kapa Fidelity)。是經過修飾的,耐熱的高保真DNA多聚酶。既有5到3的多聚酶活性,又有3到5外切校正功能,因此能夠擴增出優質的高保真片段。高保真:Kapa高保真DNA多聚酶的擴增出正確片段的幾率是普通Taq酶的15倍,KOD/Pfx2倍;應用廣泛:可以擴增出長至6kb的質粒或者lambda DNA,或者長至2kb的基因組DNA擴增;用量少:由于其高活性,和其它的高保真產品相比,每個反應的用量要少,從而為實驗者節省資金;易于克隆:Kapa高保真DNA多聚酶擴增出鈍頭產物,非常易于克隆;快速:擴增速度是pfu的2-3倍。 另外,還有普通的KapaTaq DNA多聚酶,以及熱啟動酶,T4連接酶,快速連接試劑盒等產品。